十二指腸賈第蟲（Giardia duodenalis）、微小隱孢子蟲（Cryptosporidium parvum）、芽囊原蟲（Blastocystis spp.）和畢氏腸微孢子蟲（Enterocytozoon bieneusi）是四種常見的人獸共患寄生蟲，通常與宿主的嚴重腹瀉和腸道疾病相關(guān)。本研究建立了一種多重PCR檢測方法，用于同時檢測山羊糞便樣本中這四種人獸共患原蟲，并評估其檢測效果。根據(jù)從GenBank獲取相應病原的保守基因序列設計特異性引物，并優(yōu)化PCR反應條件。從130個臨床樣本中提取基因組DNA，并開展單病原PCR和多重PCR檢測。多重PCR成功擴增出不同病原的特定基因片段（賈第蟲：1400 bp；微小隱孢子蟲：755 bp；芽囊原蟲：573 bp；畢氏腸微孢子蟲：314 bp）。該檢測方法的靈敏度為≥102拷貝的病原DNA，且對其他常見腸道寄生蟲呈陰性，表明其具有較高特異性。在臨床樣本檢測中，賈第蟲、微小隱孢子蟲、芽囊原蟲和畢氏腸微孢子蟲的陽性檢出率分別為23.08%（30/130）、24.62%（32/130）、41.54%（54/130）和12.31%（16/130），皆與單病原PCR的檢測結(jié)果一致。以單病原PCR檢測結(jié)果為金標準，多重PCR法對糞便樣本中賈第蟲、畢氏腸微孢子蟲、微小隱孢子蟲和芽囊原蟲的DNA檢測靈敏度、陽性預測值及預測值均為100.00%。本試驗建立的多重PCR方法顯示出較高的特異性、敏感性、準確性和成本效益，同時也為山羊糞便樣本中該四種原蟲的快速檢測和流行病學調(diào)查提供了技術(shù)支持。
中國疾控中心寄生蟲病所洪煬研究員和佛山科學技術(shù)學院的陳勝鋒教授為本文的并列通訊作者，該文發(fā)表于Veterinary sciences 2024, 11(9), 448.
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